Благовещение - один из наиболее распространённых сюжетов в христианском искусстве, известный с IV-V веков. В его основу положено событие, описанное в Евангелии от Луки: архангел Гавриил возвещает деве Марии о рождении от нее Сына Божия. В византийском и русском искусстве существовало несколько вариантов этого сюжета. Изображение на ярославской иконе относится к иконографическому типу, получившему распространение в московской живописи в конце ХV-середине XVI века. Богоматерь сидит на престоле, покорно склонив голову. К Ней подходит благословляющий Архангел. В его руке жезл - символ небесного посланничества, другая рука протянута с жестом обращения. Богоматерь, услышав приветствие вестника, подняла левую руку ладонью вверх. Этот жест может одновременно означать и ответное приветствие, и принятие «Благой Вести», и смятение Богоматери при появлении вестника. Через нисходящий на Марию Святой Дух, изображенный в виде луча и голубя, символически передается на иконе тайна Непорочного Зачатия. У ног Богоматери изображена сидящая за прялкой служанка - персонаж, который присутствует в ряде греческих и русских икон ХV-ХVII веков. Предположительно, в этом образе аллегорически выражена тема новой судьбы и новой жизни: красная нить на веретене - символ созидающейся плоти Христа. Центральную композицию на ярославской иконе окружают 24 клейма, иллюстрирующие Акафист Богоматери. Икона написана в первой половине XVI века московским мастером, работавшим в Ярославле.